Evaluation of microphthalmia associated transcription factor (MITF) expression in peripheral blood of a population with malign melanoma and control population and cell lines.

Abstract

Background: The incidence of malign melanoma tumours has increased more rapidly than any other type of cancer; this has intensified the searching for tools that facilitate early detection of melanoma. Microphthalmia associated transcription factor (MITF) is currently known as being a master melanocyte regulator. The article analyses MITF gene expression in peripheral blood of individuals suffering from melanoma, compared to people without any type of cancer and some cell lines. Materials and methods: Thirty one samples of peripheral blood were used: 19 from patients having melanoma and 12 from healthy people. Then RNA was extracted from these samples. MITF and housekeeping genes (β2M and GAPDH) expression levels were then quantified by real-time PCR. Five cell lines were also used to determine the MITF expression. Results: MITF gene expression could be observed in all individuals, though no statistical significant differences were found among expression levels in the groups studied (p=0.09). Even so, MITF expression in the group of patients suffering from melanoma was much more variable than that observed in the group of cancer-free people. Expression was detected in the cell line AGS (gastric adenocarcinoma), not yet described. Conclusions: MITF gene expression levels were detected in the peripheral blood from both people suffering from melanoma and people without any type of cancer. However, variability in the number of molecules in MITF gene expression was observed in people with melanoma, this suggests the presence of tumour cells in circulation. Introducción: La incidencia de melanoma maligno se ha incrementado más rápido que cualquier otro tipo de cáncer, intensificando así la búsqueda de herramientas que faciliten la identificación temprana del melanoma. El factor de transcripción asociado con microftalmia (MITF) es conocido como el regulador maestro de melanocitos. En el presente estudio se analiza la expresión del gen MITF en sangre periférica de un grupo de individuos con melanoma, comparándola con un grupo de personas sin cáncer y en algunas líneas celulares. Materiales y métodos: Se extrajo ARN de 31 muestras de sangre periférica: 19 de pacientes con melanoma y 12 de personas sin ningún tipo de cáncer. Se cuantificaron niveles de expresión tanto para el gen MITF como para los genes de expresión constitutiva (β2M y GAPDH) mediante PCR tiempo real. Asimismo se evaluó la expresión de los mismos genes en cinco líneas celulares. Resultados: En todos los individuos se observó expresión del gen MITF, aunque no hubo diferencias estadísticamente significativas entre los niveles de expresión en los grupos de estudio (p=0.09). Sin embargo, la expresión de MITF en el grupo de pacientes con melanoma fue más variable que la observada en el grupo de personas sin cáncer. Asimismo, en la línea celular de adenocarcinoma gástrico se detectó expresión del gen MITF, no descrita hasta el momento. Conclusiones: Se encontraron niveles de expresión del gen MITF en sangre periférica tanto de personas con melanoma como en personas sin cáncer. Sin embargo, la variabilidad en los niveles de expresión del gen MITF observados en personas con melanoma, sugiere la posible presencia de células tumorales en circulación.