Evaluación inmunohistoquímica de la expresión de calbindina en el cerebro de ratones en diferentes tiempos después de la inoculación con el virus de la rabia.
Artículo de revista
2012-11-29
Introducción: La calbindina (CB) es una proteína reguladora del metabolismo del calcio intracelular. Previamente se
demostró que la infección con virus fijo de la rabia induce pérdida de la expresión de CB, en el cerebro de ratones en estado
terminal de la enfermedad, a los 7-8 días de post-inoculación (p.i.) intramuscular.
Objetivo: Determinar si la pérdida de expresión de CB se presenta también en etapas tempranas de la infección y si es una
consecuencia inmediata a la aparición de antígenos virales en el cerebro.
Materiales y métodos: Se inocularon ratones con virus fijo de la rabia, por vía intramuscular, en su extremidad posterior
izquierda. Diariamente se tomaron entre 4 y 6 animales infectados y sus respectivos controles, se fijaron por perfusión
intracardíaca con paraformaldehído, se extrajeron sus cerebros y se obtuvieron cortes coronales en un vibrátomo. Estos se
sometieron a reacciones inmunohistoquímicas para evaluar la presencia de antígenos virales y la expresión de CB. Esta última
fue cuantificada mediante densitometría óptica en un microscopio con análisis de imágenes.
Resultados: La inmunorreactividad a la rabia fue positiva en el cerebro a partir del día 3 p.i.; se observó primero en neuronas
piramidales de la corteza frontal. La inmunotinción para CB no sufrió ninguna alteración cualitativa ni cuantitativa en la corteza
cerebral y el estriado hasta el día 6 p.i.
Conclusiones: Estos resultados coinciden con los de otros estudios sobre la rabia en los que se han encontrado alteraciones
moleculares, metabólicas o fisiopatológicas en el sistema nervioso sólo en la fase terminal de la enfermedad.Introduction: The calcium-binding protein calbindin (CB) plays a critical role in intracellular calcium metabolism. In a
previous study we demonstrated that the infection with fixed rabies virus caused loss of CB expression in mouse brain during
terminal state of the disease, 7-8 days after intramuscular inoculation.
Objectives: To determine loss of CB expression also appears in early stages of the infection and if it is a consequence
immediate to the appearance of viral antigens in the brain.
Materials and methods: Mice were inoculated with fixed rabies virus, by intramuscular route, in the left hind limbs. Daily,
to sixth day, 4-6 animals and their respective controls were killed and fixed by intracardiac perfusion with paraformaldehyde
and their brains were extracted to obtain coronal sections using a vibratome. Free-floating sections were treated by
immunohistochemical procedures to evaluate the presence of rabies viral antigens and the expression of CB. The last one
was quantified by optical densitometry in a microscope with a system of image analysis.
Results: Rabies immunoreactivity was observed in the brain three days after virus inoculation, beginning in pyramidal
neurons of the frontal cortex whereas the immunostaining for CB did not undergo any qualitative nor quantitative changes
neither in the cerebral cortex or striatum during the six days post-inoculation. Conclusions: These results agree with other studies in
which it has been settled down that the rabies molecular or
metabolic effects on the nervous system are well-known only
in the final stage of the disease.
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