Vigilancia del dengue basada en el laboratorio: diferencias en el número de casos y virus aislados según la recolección del suero y la prueba serológica

Abstract

Introducción: El control del dengue depende de los datos de la vigilancia basada en el laboratorio. El objetivo de este estudio fue establecer las diferencias en número de casos (IgM positiva) y serotipos del virus según la estrategia de vigilancia. Materiales y métodos: Se compararon los resultados de dos estrategias de vigilancia. Primera (SIVIGILA local): de 337 casos con sospecha clínica de dengue se colectó un único suero (agudo o convaleciente) que se almacenó a 4oC. Se utilizó el estuche UMELISA DENGUE (IPK, Cuba) para detectar anticuerpos IgM y se hicieron intentos de aislamiento del virus en células C6/36. Segunda: de 318 casos sospechosos se colectaron sueros pareados que se almacenaron a -70oC, se usó una prueba local de MAC-ELISA y se intentó el aislamiento del virus como en la primera. Algunos sueros procesados por el MAC-ELISA se analizaron también por el UMELISA y los estuches Dengue IgM-capture ELISA (PANBIO) e IgM*ELISA anti-dengue (IPK, Cuba). Resultados: Se encontraron más casos IgM+ con la primera que con la segunda estrategia tanto con sueros agudos como convalecientes. Esto es, 61.1 vs 22% (p<0.001) y 86.8 vs 49.3% (p<0.001), respectivamente. Los resultados del MAC-ELISA concordaron 85% (k=0.29) con los del UMELISA, pero 90.4% (k=0.84 ) y 100% (k=1) con los estuches de PAMBIO e IgM*ELISA, respectivamente. Se encontraron diferencias significativas en la frecuencia del dengue en casos de la segunda estrategia, cuando el resultado de la serología con suero agudo o con pareado se comparó: 70 (22%) vs 155 (48.7%) (p<0.001). El aislamiento viral fue más exitoso de los sueros almacenados a -70oC que a 4oC: 17.8% vs. 4.7% (p<0.001). Se identificaron los 4 serotipos del virus. Se discuten la especificidad del UMELISA DENGUE y las consecuencias en el control del dengue en relación a la estrategia de vigilancia. Conclusiones: Se requiere evaluar la especificidad del estuche UMELISA considerando la alta frecuencia del dengue en casos con sospecha. El análisis de sueros pareados en la vigilancia del dengue es necesario para obtener información confiable. Background: Dengue control measures depend on the laboratory-based surveillance data. In this study was investigated the differences in dengue cases and viruses isolated in according with surveillance strategy. Study design and methods: Two surveillance strategies were analyzed in this study. First (Local Surveillance System): single serum sample (acute or convalescent) was collected from 337 dengue suspected cases and then kept at 4oC. IgM antibodies were detected using UMELISA DENGUE kit (IPK, Cuba), and serotypes identification was performed by viral isolation attempts in C6/36. Second: paired serum sample were collected from 318 dengue suspected cases and then kept at -70 ºC. IgM antibodies were detected using MAC-ELISA test and virus isolation as above. Some paired sera analyzed by MAC-ELISA were processed by “Dengue IgM-capture ELISA” kit (PANBIO) and “IgM*ELISA antidengue” (IPK, Cuba). Results: More IgM+ dengue cases were detected by the first than second strategy using acute or convalescent serum: 61.1 vs 22% (p<0.001) y 86.8 vs 49.3% (p<0.001), respectively. Dengue diagnosis by MAC-ELISA was concordant in 85% (K=0.29) respect to UM-ELISA, but 100% (K=1) and 90.4% (K=0.84) respect to “IgM ELISA anti-dengue” and “Dengue IgM-capture ELISA” kits. Differences in dengue cases detected by the second strategy were found when serological result with single acute or paired samples was compared: 70 (22%) vs 155 (48.7%) (p<0.001). Dengue virus was isolated more frequently from sera kept at -70 ºC than those kept at 4 ºC: 17.8% vs. 4.7% (p<0.001). All virus serotypes were isolated. The UMELISA DENGUE test specificity and relationship between impact dengue surveillance and implemented strategy are analyzed. Conclusions: The specificity of UMELISA DENGUE test require to be evaluated by the high frequency of dengue in suspected cases. Serum paired analyzes in dengue surveillance is necessary to obtain reliable information.