Examinando por Autor "Pustovrh, Carolina"

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    PublicaciónAcceso abierto
    Desarrollo de nanocompuestos de quitosano/óxido de grafeno como potenciales andamios para Ingeniería de Tejidos.
    (Universidad del Valle, 2019-03-22) Zuluaga Corrales, Héctor Fabio; Mina Hernández, José Herminsul; Valencia Llano, Carlos Humberto; Salazar, Liliana; Pustovrh, Carolina; Ortíz, Mario Alejandro; Navia Porras, Diana Paola; Delgado Ospina, Johannes; Grande, Carlos David; Valencia Zapata, Mayra Eliana; Grupo de Investigación Tejidos Blandos y Mineralizados (TEBLAMI); Grupo de Investigación de Biomateriales Dentales; Grupo de Investigación Síntesis y Mecanismos de Reacción en Química Orgánica - SIMERQO; Grupo de Investigación Grupo Materiales Compuestos (GMC); Grupo Biotecnología - Universidad de San Buenaventura Cali
    Uno de los grandes desafíos en el campo de la medicina, ha sido el relacionado con la regeneración del tejido óseo, ya que la pérdida de este, se da de manera constante por diferentes causas tales como, accidentes o enfermedades degenerativas. En esta investigación se desarrollaron andamios poliméricos basados en quitosano reforzado con óxido de grafeno con el fin de estudiar sus propiedades físicas, químicas, y biológicas para evaluar su posible aplicación en regeneración de tejido óseo. Estos se prepararon mediante las técnicas de electrospinning y liofilización. Para el electrospinning se empleó CS comercial con un peso molecular promedio viscoso (Mv) de 144900 g/mol y un grado de desacetilación (DA) de 90 % calculado por análisis elemental y resonancia magnética nuclear protónica (RMN 1H) y GO sintetizado mediante un método modificado de Hummers. Por otro lado, los andamios obtenidos por liofilización fueron preparados con CS extraido experimentalmente del micelio del hongo Aspergillus Niger con un rendimiento del 11,5%, un peso molecular promedio viscoso (Mv) y promedio en peso (Mn) de 18715 g/mol y 6482 g/mol, respectivamente y un grado de desacetilación (DA) de 55,7% y 66,7% calculados por el método potenciométrico y por RMN-1H respectivamente. Tanto los andamios electrohilados como los liofilizados fueron preparados con tres formulaciones que presentaban diferente porcentaje de GO (0, 0.5 y 1 %); estos fueron analizados mediante SEM, FTIR, degradación hidrolítica en fluido biológico simulado, pruebas antibacterianas y experimentación in vivo mediante implantación subcutánea en biomodelos ratas Wistar. Los resultados demostraron que los andamios son biocompatibles, biodegradables y poseen propiedades antibacterianas, confirmando su potencial para ser aplicados en ingeniería de tejidos y regeneración celular.
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    PublicaciónAcceso abierto
    Determinación de la Fosfatasa Ácida Tartrato resistente en muestras óseas decalcificadas de cerdo sus Domesticus.
    (2015-10-02) Valencia, Carlos; Franco, Manuel; Pustovrh, Carolina; Salazar, Liliana
    Introducción: Las técnicas de Inmunohistoquímica son hoy en día una de las herramientas más importantes en el diagnostico histopatológico, sin embargo la manipulación de las muestras y el método de procesamiento puede llevar a cambios en la estructura de las proteínas que llevan a enmascaramiento de antígenos, dificultando la identificación con anticuerpos. Entre los diferentes métodos de recuperación antigénico propuestos en la literatura, el de calor húmedo con Vaporera ha tenido gran aceptación por su simplicidad, control y bajo costo. Objetivo: En el presente trabajo se propone un protocolo de recuperación antigénica con calor húmedo, en muestras de tejido óseo que ya habían sido previamente fijadas en formaldehido, decalcificadas con etilendiaminotetraacético (EDTA), e incluidas en parafina. Materiales y método: Se utilizaron muestras de tejido óseo de cerdo que habían sido preparadas con técnicas convencionales, pertenecientes a la colección del laboratorio de patología de la Universidad del Valle. Se realizó refijacion en glutaraldehido y se empleó una vaporera para intensificar la exposición de antígenos. Se utilizó como anticuerpo primario el anti TRAP de DEKO®, monoclonal, originado en ratón, y como secundario el KIT UltraVision LP Large Volume Detection System HRP Polymer ®. Resultados: En todas las muestras expuestas al anticuerpo primario en diluciones 1:20 y 1:40 se observó inmunotinción de células mononucleares compatibles con pre osteoclastos, y células gigantes multinucleadas compatibles con osteoclastos. Conclusiones: La recuperación antigénica con calor húmedo es un método confiable en la recuperación antigénica de muestras óseas fijadas con formaldehido. SUMMARY Introduction: Nowadays, Immunohistochemistry are one of the most important techniques in the histopathological diagnosis. Despite of handling and processing cautions, both of them may generate changes in the protein structure, masking antigens, preventing antibody identification. Among different antigen retrieval methods proposed by the literature, the humid heat with Steamer has been widely accepted for its simplicity, control and low cost. Objective: In this paper a protocol for humid heat antigen retrieval use in bone tissue samples that had been previously fixed in formaldehyde, decalcified with ethylenediaminetetraacetic (EDTA ), and embedded in paraffin is proposed. Materials and methods: Samples of pig’s bone that had been prepared with conventional techniques, from the collection of the pathology laboratory of the University of Valle were used. New fixed process was performed in glutaraldehyde and a steamer was used to enhance antigen exposure. The anti-TRAP DEKOs ®, mouse monoclonal antibody was used as primary antibody, and the KIT UltraVision LP Large Volume Detection System HRP Polymer ® was used as a secondary antibody. Results: In all samples exposed to primary antibody in 1:20 and 1:40 dilutions immunostaining mononuclear cells compatible with preosteoclasts were observed; immunostaining multinucleated giant cells consistent with osteoclasts were described. Conclusions: Humid heat for antigenic recovery is a reliable method for the recovery of bone antigen samples fixed with formaldehyde.
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    PublicaciónAcceso abierto
    Nivel y patrón de expresión del receptor de adiponectina-2 en la placenta de biomodelos obesos.
    (Universidad del Valle, 2020) Chávez Sierra, Laura Camila; Niño Castro, Andrea Cecilia; Pustovrh, Carolina
    La obesidad gestacional se ha asociado con múltiples complicaciones tanto para la salud materna como para la salud fetal. Se ha propuesto que uno de los vínculos entre la obesidad y las complicaciones observadas en la gestación es la distorsión de la actividad endocrina del tejido adiposo. Particularmente, la adiponectina sufre una disminución abrupta y significativamente mayor durante la gestación en condiciones de obesidad. Esta adipoquina no cruza la barrera placentaria por lo que sus efectos en la placenta estarían mediados por sus receptores Adipor1 y Adipor2. Este estudio, se propuso establecer si existen alteraciones en el nivel y el patrón de expresión del receptor de adiponectina 2 (Adipor2) en la placenta de biomodelos obesos a 12,5 días de gestación. Los resultados mostraron que la adiponectina en plasma es significativamente menor en biomodelos gestantes obesos que en sus contrapartes control. Entre tanto, el receptor Adipor2 conserva un patrón de expresión similar en la placenta de biomodelos control y obesos. No obstante, se detectó un incremento en la inmunomarcación en la zona de unión y la decidua de la placenta, así como en el miometrio de gestantes obesas en comparación con los biomodelos control. Estos resultados podrían sugerir que existe un mecanismo de compensación que mitigaría los efectos deletéreos de la disminución drástica de la adiponectina en la gestación temprana en biomodelos gestantes obesos. Sin embargo, se requieren estudios a nivel funcional para someter a prueba esta hipótesis