Examinando por Materia "Enzimas"

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    Actualidades en Bioquímica : Efectos bioquímicos del flúor sobre bacterias orales.
    (2011-10-14) Echeverri, María Teresa de
    En el momento las evidencias indican que el flúor tiene una multitud de efectos directos e indirectos sobre la célula bacteriana.(AU)
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    Hidrólisis enzimática de residuos de la cosecha de la caña de azúcar (hojas y cogollos) para la producción de etanol.
    (2019-01-25) Salcedo Mendoza, Jairo Guadalupe; López Galán, Jorge Enrique; Flórez Pardo, Luz Marina
    Con esta investigación se evaluó la hidrólisis enzimática de sustratos heterogéneos obtenidos en los residuos de la cosecha de caña de azúcar (hojas y cogollos) que puedan ser utilizados en la obtención de alcohol carburante. Inicialmente, definiendo una metodología para la obtención de biocatalizadores para la hidrólisis de residuos de caña de azúcar. Para este caso, se prepararon ocho sustratos, los cuales fueron obtenidos por deslignificación organosolvente, tratamiento con hidróxido de sodio, deslignificacion enzimática y un sustrato al que no se le aplicó ningún tratamiento. Los diferentes sustratos fueron hidrolizados con cinco cocteles enzimáticos derivados de mezclas de enzimas comerciales, Las reacciones se llevaron a cabo a una temperatura de 40 Co, con una relación sólido/líquido de 6/100, en soluciones buffer acetato de 4.8. Se determinó el porcentaje de sacarificación, el índice de sacarificación a través de la construcción de progreso con base en la producción de azúcares reductores en función del tiempo. Se implementó un diseño experimental tipo factorial para las variables; tipo de sustrato, mezcla de enzima y relación enzima/sustrato. Con los datos recolectados, se determinó el índice de hidrólisis e índice global de hidrólisis. En el análisis de la información se utilizó estadística descriptiva usando el Software StatGraphics®. Para generar las bases para seleccionar las mezclas de actividades enzimáticas utilizando el índice global de hidrólisis, se manejó la herramienta de lógica difusa del software MATLAB®. Lo resultados presentaron regiones de máximo índice global de hidrólisis para residuos de la cosecha de la caña de azúcar, los cuales se encuentran entre 20 - 30 FPU/ml y 400 - 800 p NPG U/ml de actividad betaglucosidasa y actividad hemicelulasa entre 50 y 70 UI/ml, indicando que es importante el papel de la betaglucosidasa en la hidrólisis enzimática de sustratos lignocelulósicos y que no es necesario grandes cantidades de enzimas celulolitícas, sino una buena dosificación de estas.
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    Mecanismos de resistencia a insecticidas piretroides en Aedes (Stegomyia) Aegypti de Colombia, vector principal de los virus dengue, chikungunya y zika
    (Universidad de Valle, 2017) Aponte Hincapié, Angélica; Ocampo, Clara Beatríz
    En Colombia Aedes aegypti es el principal vector de los virus dengue, chikungunya y Zika. Este vector, adaptado al ambiente urbano, posee una alta capacidad de desarrollar mecanismos de resistencia a los insecticidas que pueden afectar el control vectorial. Objetivo: Identificar los mecanismos enzimáticos y moleculares asociados a la resistencia a insecticidas piretroides en cepas seleccionadas en laboratorio (n=3) y cepas colectadas en campo de diferentes ciudades de Colombia Ae.aegypti (n=7), con el fin de proponer estrategias para el manejo de la resistencia a estos insecticidas Métodos: Tres cepas, seleccionadas en el laboratorio para resistencia al DDT, Propoxur y lambdacialotrina, se compararon con 7 cepas colectadas en el campo. Se usó la cepa Rockefeller como control susceptible. Se realizaron bioensayos de CDC para medir el estado de susceptibilidad a los piretroides tipo I (permetrina) y II (deltametrina y lamdacihalotrina) y potencial resistencia cruzada con diferentes tipos de insecticidas, incluyendo el organoclorado (DDT), carbamato (propoxur) y organofosforado (malatión). La actividad enzimática de esterasas, glutathion S transferasas y citocromo P450 se midió mediante pruebas bioquímicas. La detección de frecuencias de las mutaciones de kdr Val1016Ile y Phe1534Cys se determinaron mediante PCR en tiempo real. Un análisis proteómico de los túbulos de Malpighi e intestino medio fue realizado usando espectrometría de masas de alta definición. Resultados: Todas las cepas fueron resistentes a la permetrina, con excepción de 1cepa de campo y la cepa "DDT" seleccionada en el laboratorio. Tres cepas (seleccionadas "propoxur" y "Lambdacihalotrina" y 1 cepa de campo) fueron resistentes a ambos tipos de piretroides (Tipo I y II). Todas las cepas evaluadas fueron resistentes al DDT. Evidenciamos resistencia cruzada entre lambdacialotrina y propoxur, sin embargo todas las cepas de campo fueron susceptibles a propoxur. No hubo de resistencia al malatión en ninguna cepa. El principal mecanismo enzimático observado en las cepas resistentes fue GSTs. Las mutaciones kdr se detectaron en todas las cepas. Las frecuencias alélicas de Cys1534 (0.44 a 0.99) fueron mayores que para Ile1016 (0.02 a 0.72). Las cepas que tenían frecuencias más altas de ambas mutaciones fueron resistentes a los insecticidas piretroides. Finalmente, el análisis proteómico confirmó la ruta metabólica del metabolismo del glutatión y evidencia adicional de la sobre-regulación en la traducción y las proteínas ribosómicas en los mosquitos resistentes. Conclusión: resistencia a los piretroides en Ae. aegypti de Colombia se asocia principalmente a un aumento de las enzimas GSTs y a la alta frecuencia de las mutaciones Kdr. La sobre-regulación de las proteínas ribosómicas en las cepas resistentes puede sugerir un aumento en el recambio proteico y/o la expresión genética alterada.
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    Obtención de papaína a partir del látex de la Carica-Papaya por medio de un sistema de dos fases acuosas
    (Universidad del Valle, 2012) Balcázar Valencia, Juan David; Victoria Sterling, Angélica Maria; Restrepo Osorio, Jaime; Rodríguez Acosta, John Wilman
    Se utilizó un sistema de dos fases acuosas polietilenglicol 6000 (PEG) - sulfato de amonio para purificar papaína contenida en el látex de la Carica papaya. Se obtuvo un sistema líquido-líquido formado por una fase inferior donde se concentró el sulfato de amonio y una fase superior donde se concentró el PEG, la enzima se recuperó en esta última. La fase superior se separó del sistema, se le adicionó KClO4 en solución y se aumentó su concentración de PEG hasta 20 % (p/p), esto ocasionó la precipitación de la enzima hacia la solución salina. Posteriormente se liofilizó a ¿ 80 °C y 9,8 Pa para obtener el producto en polvo. Se determinó la actividad enzimática del producto por medio de un método analítico para cuantificar la actividad proteolítica vegetal y se calculó la concentración de la enzima por medio del método cuantitativo de Biuret. A partir de estos valores se determinó la actividad específica de la enzima que fue la variable de respuesta. Se evaluó el efecto de la concentración inicial de la muestra, el pH, la concentración de PEG y la concentración de sulfato de amonio, para determinar las mejores condiciones de purificación. Las variables que tuvieron un efecto significativo en el proceso fueron el pH, la concentración inicial de la muestra y la concentración de sulfato de amonio. La actividad específica se favoreció para el nivel alto de concentración de sulfato de amonio y los niveles bajos de pH y concentración inicial de la muestra. El mejor sistema de purificación consistió en 12% PEG 6000, 15% sulfato de amonio, 10 mg/ml de muestra inicial y se efectuó a pH 4. Por medio de este sistema se obtuvo un producto con actividad específica de 6560 U/mg.
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    PublicaciónAcceso abierto
    Patogénesis de la enfermedad periodontal.
    (2011-10-18) Contreras R., Adolfo
    La periodontitis es una enfermedad que afecta los tejidos de soporte y protección periodontal, los signos y síntomas que genera son inflamación, sangrado, pérdida de inserción, movilidad dental, pérdidas óseas y bolsas periodontales. Tales cambios poseen uno base microbiológica, en especial los factores de virulencia presentes en algunos géneros bacterianos explican cuando menos en gran parte los diversos mecanismos que interactúan en la patogénesis de la enfermedad periodontal. El concepto de especificidad bacteriana en esta entidad cobra en la actualidad importancia, y las diversas formas de enfermedad periodontal se asocian con géneros periodontopatógenos específicos. Los estudios revelan que sólo un pequeño número de las 300 especies encontradas en la placa bacteriana subgingival se asocian con periodontitis, de las cuales las más frecuentemente implicadas son: Actinomyces actinomicetemcomitans, Porphyromonas gingivalis e intermedius, Capnocytophaga spp, Eikenella corrodens, Fusobacterium nucleatum, Wolinella recta y Eubacterium spp. El conocimiento de sus factores de virulencia, permitirá entender mejor esta enfermedad y además ofrece al clínico una serie de alternativas con futuras implicaciones terapéuticas como: a) uso de agentes específicos que eliminen la flora patógeno, b) inmunización para prevenir la colonización de bacterias periodontopáticas o, c) facilitar la recolonización de las bolsas periodontales con especies bacterianas compatibles con salud.(AU)